Efecto de los factores de transcripción SRY y CREB en la regulación del promotor CATSPER 1 de humano Public Deposited
CATSPER 1 es un gen que descodifica para una de las proteínas del canal CatSper permeable a calcio que es indispensable para la movilidad flagelar del espermatozoide, y su expresión es exclusiva de células germinales masculinas. Es relevante analizar los factores de transcripción (FT) que regulan al promotor del gen CATSPER 1 de humano, ya que éste es importante para la fertilidad y la anticoncepción masculina. Por lo que si el gen CATSPER 1 se expresa durante la diferenciación del espermatozoide, se espera que FT como CREB y SRY presentes en la espermatogénesis regulen su expresión. El objetivo es la caracterización molecular de la actividad transcripcional del promotor CATSPER 1 y la participación de los FT SRY y CREB en su regulación. Se caracterizó la actividad transcripcional del promotor mediante la deleción secuencial del extremo 5’, transfección celular en HEK 293 y medición por quimioluminiscencia del gen reportero de luciferasa. Sobre- expresión del FT SRY y su efecto en el promotor. Evaluación de la unión de FT a sitios del promotor por EMSA. La deleción en el promotor de los sitios SRY y CREB, lejanos del inicio de la transcripción, incrementa la actividad transcripcional, lo que sugiere que los FT actúan como represores en estos sitios. Por otra parte la sobreexpresión de SRY produce el incremento de la actividad transcripcional en sitios cercanos al inicio de la transcripción. Se sigue determinando la unión de SRY y CREB en sitios específicos del promotor. SRY y CREB son reguladores negativos del gen CATSPER 1 de humano.
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