La metilación del ADN afecta a las interacciones ADN-proteína, la estructura y replicación del ADN, la expresión de genes y la diferenciación celular. La vitamina B12 es fundamental para la metilación biológica y es un paso esencial en el catabolismo de los aminoácidos de cadena ramificada, de ácidos grasos de cadena impar y de la cadena lateral del colesterol. La falta de grupos metilo disminuye la expresión de ERα y ERβ y genera alteraciones en el testículo. El objetivo de este trabajo fue determinar el daño ocasionado por la carencia de donadores de grupos metilo en testículos de rata Wistar. Se utilizaron ratas Wistar macho de 300 g que fueron divididas en 2 grupos: el control y el grupo alimentado con dieta deficiente en metionina y colina (MCD). A los animales se les mantuvo con comida y agua ad libitum, con un ciclo de luz/obscuridad de 12X12 horas. Después de 6 semanas de tratamiento, se sacrificaron mediante eutanasia en una cámara de dióxido de carbono, seguida de decapitación. Se obtuvieron los testículos, se fijaron con formalina amortiguada y se tiñeron con H&E, MT y Direct red 80. Los receptores de estrógenos (ERα, Erβ) y andrógenos (AR) se inmunolocalizaron usando anticuerpos monoclonales de conejo. Por cada testículo se observaron 5 secciones transversales de túbulos seminíferos en donde se determinó el área del túbulo seminífero, el número de espermatocitos, el índice de diferenciación y el grado de maduración del epitelio seminífero o índice de Jonhsen. La histología mostró daño en los grupos de dieta, comparados con los controles, principalmente en la integridad de las espermatogonias y los espermatocitos. En los análisis cuantitativos se observaron diferencias, pero éstas no fueron estadísticamente significativas. La expresión de los receptores mostró una diferencia variada en los dos grupos dependiendo del receptor estudiado. Se concluyó que la carencia de donadores de metilo, provocada por la dieta, generó alteraciones a nivel histológico y de expresión de receptores de hormonas esteroideas en el testículo de rata Wistar.
DNA methylation affects DNA-protein interactions, DNA structure and replication, gene expression, and cell differentiation. Vitamin B12 is essential for biological methylation and is an essential step in the catabolism of branched-chain amino acids, odd-chain fatty acids, and the side chain of cholesterol. The lack of methyl groups decreases the expression of ERα and ERβ and generates alterations in the testis. The main of this study was to determine the damage caused by the lack of methyl group donors in Wistar rat testes. Male 300 g Wistar rats were used, which were divided into two groups: the control and the group fed a diet deficient in methionine and choline (MCD). The animals were kept with food and water ad libitum, with a light / dark cycle of 12X12 hours. After six weeks of treatment, they were euthanized by passing out a carbon dioxide chamber, followed by decapitation. Testes were obtained, fixed with buffered formalin and stained with H&E, MT, and Sirius red. Rabbit Monoclonal antibodies were used to immunolocalize estrogen (ERα, Erβ) and androgen (AR) receptors. Five crosssections of seminiferous tubules were observed. Seminiferous tubule area, the number of spermatocytes, differentiation index, and degree of maturation of the seminiferous epithelium (Jonhsen index) were determined. The histological procedures showed damage in the diet groups, mainly in the integrity of the spermatogonia and the spermatocytes. In the quantitative analyzes, there were differences, but these were not statistically significant. The expression of the receptors showed a varied difference in the two groups depending on the receptor studied. We concluded that the lack of methyl donors, caused by diet, generates alterations at the histological level and in the expression of steroid hormone receptors in the testis of Wistar rat.
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