Aislamiento y caracterización metabólica de las bacterias que hidrolizan la urea contenida en la orina humana Öffentlichkeit Deposited
La orina humana contiene alrededor del 2% de urea, la cual es hidrolizada por la enzima ureasa; produciendo amonio e incrementando el pH a valores superiores a 9. En este trabajo se aislaron y caracterizaron cultivos puros y mixtos de tres diferentes fuentes de inóculo, de acuerdo a su capacidad de hidrolizar urea. Las fuentes de inóculo evaluadas fueron: estiércol de vaca fresco, lodo granular anaerobio y orina humana. Para cada uno de los inóculos se llevaron a cabo tres enriquecimientos en un medio selectivo (Stuart) para el aislamiento de bacterias productoras de ureasa, y en el que se presente la actividad ureásica. De los cultivos mixtos enriquecidos a partir de lodo granular, se aislaron 3 cepas de bacterias aerobias y una cepa a partir de estiércol de vaca, por medio de la técnica de dilución en superficie. Con los cultivos mixtos obtenidos, se realizaron cinéticas para probar el efecto de la temperatura y la concentración de sustrato en la hidrólisis de urea. Se obtuvo que los cultivos mixtos provenientes del estiércol enriquecido con glucosa y oxígeno (EGO2) alcanzaron la mayor velocidad de producción de amonio a los 40°C, mientras que los cultivos mixtos provenientes del lodo enriquecido con oxígeno (LO2) favorecen la producción de amonio a los 28°C y 30°C. A partir de los resultados obtenidos se determinaron las constantes cinéticas (µmáx y Ks) y la energía de activación. Para los cultivos EGO2 y LO2 las energías de activación en medio Stuart fueron de 9.75 y 9.16 Kcal/mol; valores que son similares en orden de magnitud a los reportados en la literatura. Para el cultivo EGO2 se obtuvo una µmáx de 0.01 mM NH4 + /h y una Ks de 0.19 mM y de 0.28mM en un segundo enriquecimiento. En el caso del cultivo LO2 se obtuvo una µmáx de 0.06 mM NH4 + /h y una Ks de 4.94 mM. Finalmente los cultivos EGO2 y LO2 fueron capaces de hidrolizar la urea en orina humana, con eficiencias de 0.46 gNH4 + / g urea y de 0.19 gNH4 + / g, respectivamente. En este trabajo se aislaron bacterias productoras de ureasa a partir de lodos granulares y de estiércol de vaca, pero mostraron actividad ureásica en consorcio. Estos consorcios favorecieron la hidrólisis de urea a temperaturas entre los 28°C y 40°C, respectivamente. Así mismo se logró hidrolizar la urea contenida en la orina humana por vía bacteriana.
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UAMI16107.pdf | 2021-08-09 | Öffentlichkeit |
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