Contribución al estudio bioquímico del zigomiceto Ñ Public Deposited
Con el paso del tiempo el hombre ha buscado la manera de satisfacer ciertas necesidades, creando productos a partir de compuestos químicos sintéticos que no se encontraban normalmente en la naturaleza, los llamados xenobióticos. Los compuestos xenobióticos también pueden formarse eventualmente durante algunos procesos industriales y son eliminados al ambiente como desechos. En los últimos años el uso indiscriminado de xenobióticos a causado la contaminación del medio ambiente, debido a que muchos de estos xenobióticos presentan propiedades tóxicas para muchos organismos, incluyendo al hombre; de ahí la necesidad de eliminarlos. Unos de los métodos más eficientes para la eliminación de los compuestos xenobióticos ha sido la degradación con microorganismos que cuenten con sistemas enzimáticos capases de degradar este tipo de tóxicos. Entre los xenobióticos más recalcitrantes y tóxicos se encuentra el pentaclorofenol (PCF). El PCF pertenece a la familia de los clorofenoles, fue el primer producto usado como conservador de maderas, también ha sido utilizado como agente bactericida, fungicida y alguicida e insecticida y se forma en los de efluentes de la industria de la pulpa y el papel. Se han encontrados hongos pertenecientes a la familia de los basidiomicetos capaces de degradar compuestos fenólicos, gracias a que tienen sistemas enzimáticos constituidos por peroxidasas (MnP, LiP, VP) y fenoloxidasas (lacasas) extracelulares, mostrando rendimientos altos de degradación pero muy bajas velocidades de crecimiento. Sin embargo, se han encontrado otro tipo de hongos filamentosos capaces de degradar compuestos fenólicos, con velocidades de crecimiento mayores a los basidiomicetos, estos hongos pertenecen a la familia de los zigomicetos. En los zigomicetos los principales complejos enzimáticos responsables de la degradación del compuestos fenólicos son las fenoloxidasas (tirosinasa y lacasa) y no presentan actividades de peroxidasas. Podría pensarse, por lo tanto, que un zigomiceto que presentara actividad enzimática extracelular de peroxidasas podría ser más eficiente en la degradación de compuestos fenólicos; como el PCF. En este trabajo se utilizó a un zigomiceto aislado de un efluente de un aserradero de Puebla, que podía tolerar y degradar del 80 al 90% PCF inicial (12.5 mg ml-1, concentración inicial de PCF) en las primeras 48 horas. A este zigomiceto se le nombró como “Ñ”. Pruebas iniciales de tipo cualitativas mostraron que el zigomiceto Ñ mostraba actividad enzimática de tirosinasa y LiP extracelular. Se identificó molecularmente al zigomiceto Ñ como Rhizopus oryzae ENHE. Se demostró mediante fermentaciones sumergidas en medio sintético Merlin-Norkrans (modificado), que el PCF tiene un efecto tóxico en el crecimiento de R. oryzae ENHE, igualmente el PCF tiene un efecto negativo en la actividad de tirosinasa extracelular, disminuyendo su actividad en 3.33 veces y un efecto nulo en la actividad de tirosinasa intracelular. También se demostró que la Tyr induce el crecimiento de R. oryzae ENHE en un 11% a las 24 h en los cultivos con 0.05 g L-1 Tyr, se incrementó la actividad de tirosinasa extracelular alrededor de 14% a las 48 h de cultivo con Tyr y se aumentó 1.37 veces la actividad de tirosinasa intracelular en los cultivos con 0.05 g L-1 Tyr en las primera 24 h. Por último, se demostró que R. oryzae ENHE tiene actividad enzimática de LiP y se observó que el PCF induce la actividad de LiP. No se encontró actividad de MnP.
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