Evaluación inmunológica de un complejo inmunoestimulante a base de nanopartículas lipídicas con ácido glicirricínico (GA) acoplado a proteínas recombinantes de Coronavirus (Alphacoronavirus y Betacoronavirus) Pubblico Deposited

Coronaviruses are a set of viruses that affect both public and veterinary health. Diseases caused by these viruses are devastating health and economic issues. Newgeneration vaccines based on subunits (antigen-adjuvant) generate robust immune responses and are biologics for preventing and controlling infectious diseases. In this study, an immunostimulant complex was developed using lipid nanoparticles with glycyrrhinic acid (LNPs-GA) coupled with two viral antigens (recombinant M protein of SARS-CoV-2 and NTD-S protein of VDEP) with potential use as a vaccine. LNPs-GA were developed using the lipid film method. Recombinant rM (SARS-CoV-2) and rNTDS (VDEP) antigens were obtained using a prokaryotic system. The size, shape, and stability of these complexes were evaluated. Humoral immunostimulant capacity was determined in mice of the CF-1 strain, immunized with the complex subcutaneously, and blood samples were collected every seven days for 35 days. On the other hand, the cellular immune response (cytokine expression) in serum was determined by ELISA kits. The results showed that the LNPs-GA coupled with recombinant antigens rM and rNTD-S had a size ranging from 60-200 nm and showed stability (-27.6 mV). Evaluation of the humoral response indicated that the immunostimulant complex produces higher levels of antibodies than the control. In contrast, an assessment of the cellular response showed that the LNP-GA modulates the serum expression of two inflammatory response cytokines.

Los coronavirus son un conjunto de virus que afectan tanto en la salud pública como en la salud veterinaria. Las enfermedades producidas por estos virus generan grandes estragos en la salud y en la economía. Las vacunas de nueva generación a base de subunidades (antígeno más adyuvante) generan una respuesta inmune fuerte y sirven como biológicos para la prevención y control de enfermedades infecciosas. En este trabajo se desarrolló un complejo inmunoestimulante usando nanopartículas lipídicas con ácido glicirricínico (LNPs-GA) acopladas con dos antígenos virales (proteína M y NTD-S recombinantes del SARS-CoV-2 y del VDEP, respectivamente) con potencial uso como vacuna. LNPs-GA fueron desarrolladas mediante el método de filme lipídico. Se obtuvieron los antígenos recombinantes rM (SARS-CoV-2) y rNTD-S (VDEP) en un sistema procarionte. Se evaluó el tamaño, la forma y estabilidad del complejo. Se determinó la capacidad inmunoestimulante humoral en ratones de la cepa CF-1, los cuales fueron inmunizados con el complejo vía subcutánea y se les extrajo muestras de sangre cada 7 días durante 35 días. Por otro lado, se determinó la respuesta inmune celular (expresión de citocinas) en suero mediante kits de ELISA. Los resultados mostraron que las LNPs-GA acopladas con los antígenos recombinantes rM y rNTD-S tienen un tamaño que oscilan entre los 60-200 nm y mostraban estabilidad (-27.6 mV). La evaluación de la respuesta humoral mostró que el complejo inmunoestimulante produce mayores niveles de anticuerpos con respecto al control, mientras que la evaluación de la respuesta celular mostró que las LNPs-GA modula la expresión en suero de dos citocinas de respuesta inflamatoria.

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  • 2023
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