Seguimiento de la comunidad bacteriana en suelos contaminados por hidrocarburos durante su tratamiento en biorreactores de fase semisólida Public Deposited
Los problemas de contaminación derivados de la explotación de recursos naturales como el petróleo hacen necesario la implementación de tecnologías eficientes y baratas para tratar los lugares contaminados, una de estas posibles soluciones es la biorremediación que utiliza enzimas y microorganismos para la remoción de los compuestos contaminantes. Una de la estrategias para hacer mas eficiente la biorremediación en suelos es la bioestimulación que básicamente consiste en la adición de nutrientes y aceptores de electrones para favorecer la actividad biológica de los microorganismos. Una de las formas de evaluar la respuesta de la comunidad bacteriana a la bioestimulación es mediante cuenta en placa o unidades formadoras de colonias (UFC), y que en adición permite obtener aislados de los distintos sistemas en tratamiento. El uso de técnicas de biología molecular como el análisis de amplicones con enzimas de restricción (PCR-REA) y la electroforesis en gel con gradiente desnaturalizante DGGE, nos permiten evaluar con mayor eficacia el comportamiento de los microorganismos que intervienen en la biotransformación de compuestos contaminantes. El objetivo de este trabajo fue comparar las poblaciones bacterianas de suelos contaminados con hidrocarburos, tratados en distintos biorreactores en fase semisólida con y sin bioestimulación, así como tipificar los aislados hidrocarbonoclastas más abundantes en cada tratamiento. Los conteos se llevaron a partir de tres reactores de tambor rotatorio de fase semisólida; el reactor E1 con 150 g de carga sin bioestimulación, E2 con 150 g de carga y bioestimulación con solución mineral M9, E3 con bioestimulación de solución mineral M9 y 5000 g de carga en el sistema. El numero de cuentas viables aumenta significativamente (P>0.005) en los sistemas bioestimulados tanto en los medios para bacterias hidrocarbonoclastas y totales. Se aislaron 31 cepas en medio para bacterias hidrocarbonoclastas para las diferentes muestras, tomando las características morfológicas de las colonias. Estos aislados se sometieron a la extracción de DNA y posteriormente a las pruebas de PCR-REA, en donde basados en los patrones de restricción se formaron 18 grupos de cepas. Del análisis del consorcio y cepas con la metodología de DGGE, con respecto al tiempo se observan cambios en los patrones de bandas, conforme se lleva a cabo la biodegradación en los 3 experimentos, en la comparación de los sistemas bioestimulados y sin bioestimular también se encontraron algunos cambios en las bandas de un experimento a otro y de los 18 grupos de cepas utilizadas, sólo dos cepas la 1 y 8 coinciden con alguna banda de los consorcios.
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