Efecto de las células del cúmulo en la viabilidad, maduración, fertilización y desarrollo embrionario después de la vitrificación de ovocitos inmaduros porcinos in vitro Public Deposited
En 1985 se logró el primer estudio de criopreservación sin la formación de cristales de hielo a través de la vitrificación de células de mamíferos. Hasta ahora, muchos estudios se han realizado para aumentar la tasa de supervivencia de los ovocitos y embriones con la finalidad de obtener crías vivas. La vitrificación de ovocitos inmaduros sigue siendo una gran área de investigación debido a que uno de los mayores retos para los criobiólogos de la reproducción es establecer un procedimiento de vitrificacióncalentamiento, que permita la creación de bancos de ovocitos y mejoras en las técnicas de reproducción asistida. La vitrificación se utiliza para criopreservar células, tejidos, órganos e incluso organismos. Esta técnica requiere del uso de agentes crioprotectores (CPAs) añadidos a una alta concentración y recipientes con altas velocidades de enfriamiento-calentamiento para minimizar la formación de cristales de hielo y daño celular. Sin embargo, su uso debe ser el más adecuado debido a su alta toxicidad. Existen pocos trabajos que reportan las tasas de viabilidad, maduración, fertilización de los ovocitos inmaduros después del calentamiento. La mayoría de los trabajos se han realizado en ovocitos maduros y embriones obtenidos in vivo en lugar de in vitro. Hasta el momento, no hay reportes donde utilicen el recipiente cryolock durante el proceso de vitrificación, y sólo un estudio ha reportado el nacimiento de crías vivas a partir de ovocitos inmaduros porcinos vitrificados con el método de vitrificación en superficie sólida (SSV). Por lo que, este estudio fue diseñado para evaluar la eficiencia de un procedimiento de vitrificacióncalentamiento utilizando el recipiente cryolock así como el efecto del co-cultivo de ovocitos inmaduros vitrificados con células de la granulosa frescas para incrementar las tasas de maduración in vitro (MIV) y desarrollo embrionario (DE) mediante las técnicas de fertilización in vitro (FIV) e inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI). En conclusión, mantener la viabilidad de las células de la granulosa es esencial para mejorar las tasas de maduración y fertilización de los ovocitos inmaduros vitrificados.
In 1985, the first study achieving ice-free cryopreservation by vitrification of mammalian cells was performed. Up to now, many studies have been carrying out to increase the oocytes and embryos survival rate in order to obtain live offspring. Immature oocytes vitrification continues to be a wide area of research because one of the greatest challenges to reproductive cryobiologists is to establish a vitrification-warming procedure that allows the banking of oocytes and the improvement of assisted reproductive technologies. Vitrification is used to cryopreserve cells, tissues, organs and even organisms. This technique requires the use of cryoprotectant agents (CPAs) added at a high concentration, and devices with high cooling–warming rates to minimize ice crystal formation and subsequently cell damage; but its use should be the most suitable because they are highly toxic. There are few repots testing immature oocyte viability, maturation and fertilization rates after warming. Most studies are conducted to matured oocytes and embryos obtained in vivo rather than in vitro. So far, there are no reports testing the cryolock device, and only one study has reported the birth of live offspring from vitrified porcine immature oocytes with the solid surface vitrification (SSV) method. Therefore, this study was designed to evaluate the efficiency of a vitrification–warming procedure using the cryolock device as well as the effect of the co-culture of vitrified immature oocytes with fresh granulosa cells to improve in vitro maturation (IVM) and embryo development (ED) by in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) techniques. In conclusion, maintaining the viability of granulosa cells is essential to improve maturation and fertilization rates in vitrified immature oocytes.
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