Activación de las vías de señalización intrínseca y extrínseca en la apoptosis testicular generada por el estrés agudo o crónico y su repercusión en la calidad espermática Público Deposited
La apoptosis en las células germinales del epitelio seminífero es un evento común que ocurre durante el desarrollo de la espermatogénesis, sin embargo, también se activa en respuesta al estrés. Actualmente no existen trabajos que relacionen la presencia de apoptosis en los testículos con la expresión de diferentes marcadores apoptóticos, así como con los cambios producidos en la calidad de espermatozoides obtenidos de la cauda del epidídimo. El objetivo de este trabajo fue evaluar si la exposición al estrés agudo y crónico activa una o ambas vías apoptóticas en las células testiculares. Se utilizaron ratas macho (n=60) de la cepa Wistar de tres meses de edad y de 250-300 g de peso corporal. Los animales se asignaron a los siguientes grupos: a) control: 1, 20, 40 y 50 días; b) estrés agudo: 1, 3, 6, 12 y 24 h y c) estrés crónico: 20, 40 y 50 días, por inmersión en agua fría. Los animales control se mantuvieron en sus cajas sin manipulación. Al finalizar las sesiones de estrés, los animales se anestesiaron y se extrajeron ambos testículos. El testículo derecho se procesó para histología. Se evalúo la fragmentación del ADN por la técnica de TUNEL. Se obtuvo el porcentaje de túbulos seminíferos que contenían células germinales positivas a TUNEL, así como el número de células germinales positivas a TUNEL contenidas en dichos túbulos. El testículo izquierdo se utilizó para determinar el contenido de Bax, Bcl-2, caspasa 3 y 8 activas por Western blot. Se evaluó la calidad de los espermatozoides de la cauda del epidídimo y se determinaron las concentraciones séricas de corticosterona y testosterona. Los resultados obtenidos en el presente trabajo, mostraron un porcentaje alto de túbulos con células germinales positivas a TUNEL en los testículos de los machos expuestos a estrés agudo, desde la primera hora, con un máximo a las 24 horas post estrés. En los testículos de los machos expuestos a estrés crónico, se observó mayor porcentaje de túbulos con células germinales positivas a TUNEL pero no en el número de células apoptóticas por túbulo. El contenido de Bcl-2 disminuyó y el de Bax, caspasa 3 y 8 activas aumentó en los testículos de los machos estresados aguda y crónicamente. La viabilidad, concentración, movilidad total y progresiva de los espermatozoides de los machos estresados crónicamente disminuyeron significativamente. La concentración de testosterona disminuyó y la concentración de corticosterona aumentó en los machos sometidos a estrés crónico. Estos datos muestran que tanto el estrés agudo como el crónico inducen apoptosis en las células testiculares. El incremento en la concentración de la caspasa 8 activa indica la activación de la vía extrínseca de la apoptosis. Mientras que el incremento de Bax así como la disminución de Bcl-2, indican la activación de la vía intrínseca. Debido a que ambas vías convergen en la activación de la caspasa 3, la cual también se incrementó, estos resultados indican que el estrés es capaz de activar ambas vías para causar apoptosis en las células del testículo. En conclusión, la apoptosis en las células testiculares provocada por el estrés agudo o crónico es activada por las vías apoptóticas intrínseca y extrínseca. Además, el estrés crónico disminuye la calidad y cantidad de los espermatozoides epididimarios. Estos resultados pueden estar relacionados con la disminución de testosterona y con el aumento de corticosterona del suero.
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