En la actualidad y desde tiempos remotos, el uso de plantas medicinales ha constituido un recurso de gran importancia para aliviar diversos problemas de salud y en algunos casos coadyuvan en los tratamientos alopáticos, por lo que constituye una alternativa ampliamente utilizada por la población. Además, el elevado costo de los fármacos convencionales, los severos efectos secundarios y/o adversos que estos provocan, aunado a la resistencia que han desarrollado los microorganismos, hacen de las plantas medicinales una fuente accesible y económica de remedios para los sectores poblacionales más vulnerables. y de bajo nivel económico. En este contexto, Cnidoscolus chayamansa conocida como "chaya", es empleada principalmente como alimento en el sureste de México por su alto valor nutricional; Además, posee diversos usos etnomedicinales: para tratar diabetes, reumatismo, trastornos gastrointestinales, problemas renales y antihipertensivo. Las hojas de C. chayamansa contienen proteínas, vitaminas, minerales, aminoácidos, ácidos grasos, flavonas y glucósidos cianogénicos. Por otro lado, las principales actividades biológicas reportadas son: antioxidante, hipoglucemiante, antiinflamatoria, hepatoprotectora, cardioprotectora, e hipocolesterolemiante. Por lo anterior se propuso utilizar una herramienta biotecnología para la optimización de compuestos con actividad biológica, principalmente la antiinflamatoria.
En el capítulo I se describe la adaptación de C. chayamansa y la obtención de explantes asépticos. Se realizó la obtención de callos con ayuda de distintos reguladores del crecimiento vegetal (RCV), mezclando una auxina con una citoquinina, como resultado a lo anterior, se obtuvieron callos con mejor morfología utilizando la mezcla de ANA (5 mg/L) + BAP. (2,5 mg/l). Posteriormente en el capítulo II se utilizó la combinación de ANA (5 mg/L) + BAP (2.5 mg/L) para la obtención del cultivo de células en suspensión; realizando una cinética de crecimiento celular de la cual se obtuvieron los siguientes parámetros: 1) velocidad de 0.078�� = �) crecimiento ିଵ ); 2) tiempo de duplicación celular (������ = 8.8 ��� ;(3 (biomasa máxima (���௫ = 8.98 ± 0.02 ���/���� ;(4 (índice de crecimiento (������ = 6.23 ± 0.056 ���/���(. Se identificó que en el día 40 pos-cultivo se concentraba la mayor cantidad de metabolitos secundarios, posteriormente se realizó el extracto CHCl3:MeOH y se denominó ANB. Por cromatografía en capa fina (ccf) se detectó escopoletina (SCO), β-sitosterol, acetato de. lupeol (AL), acetato de moretenol y otros triterpenos en el extracto ANB y por HPLC se identificó ácido cafeico, ácido ferúlico, ácido cinámico, quercetina y se cuantificó α-amirina (82.83 mg/g ANB de peso seco), acetato de β -amirina (82.31 mg/g ANB de peso seco), SCO (38.88 mg/g ANB de peso seco) y AL (38.1 mg/g ANB de peso seco). En el capítulo III se describe la actividad antioxidante, antibacteriana y antiinflamatoria del extracto ANB, dando como resultados un valor de CI50=16.60 mg/mL para el potencial antioxidante in-vitro. Por otro lado, se evaluó la actividad antibacteriana y el extracto ANB fue moderadamente activo contra tres cepas: S. aureus (ATCC 23,235) S. coagulasa (ATCC 93,410) y C. albicans (ATCC 10,231). El extracto ANB mostró una actividad antiinflamatoria mayor a la ya reportada previamente para el extracto de la planta silvestre en el modelo de inflamación aguda sistémica (carragenina) mostrando una DE50 =223.87 mg/kg, mientras que para el modelo de inflamación aguda tópica la DE50 fue de 0,48 mg/oreja. En cuanto a la actividad antiinflamatoria crónica se evaluó en el modelo crónico de TPA. Se utiliza como fármaco de referencia indometacina a la dosis de 8 mg/kg y el extracto ANB a la dosis efectiva media calculada previamente para el modelo agudo de carragenina en donde el extracto se administra vía intragástrica (225 mg/kg), observando una disminución en el peso corporal en todos los tratamientos, así como una disminución en el tamaño de las orejas en el grupo control TPA + ANB. Por último, se midió la actividad de la enzima mieloperoxidasa, la cual fue inhibida en un 34,55% en el grupo tratado con el extracto ANB, similar al mostrado por el fármaco de referencia (40,02%).Hoy en día y desde la antigüedad, el uso de plantas medicinales ha sido un recurso de gran importancia para tratar diversos problemas de salud y en algunos casos contribuyen a tratamientos alopáticos, por lo que es una alternativa muy utilizada por la población. Además, el alto costo de los medicamentos convencionales, los graves efectos colaterales y/o adversos que provocan, sumado a la resistencia que han desarrollado los microorganismos, hacen de las plantas medicinales una fuente accesible y económica de remedios para los sectores poblacionales más vulnerables y de menor nivel económico. . En este contexto, Cnidoscolus chayamansa conocida como “chaya”, se utiliza principalmente como alimento en el sureste de México por su alto valor nutricional; Además, tiene diversos usos etnomedicinales, para tratar la diabetes, el reumatismo, trastornos gastrointestinales, problemas renales y antihipertensivos. Las hojas de C. chayamansa contienen proteínas, vitaminas, minerales, aminoácidos, ácidos grasos, flavonas y glucósidos cianogénicos. Por otro lado, sus principales actividades biológicas reportadas son antioxidante, hipoglucemiante, antiinflamatoria, hepatoprotectora, cardioprotectora e hipocolesterolémica. Por lo que se propuso utilizar una herramienta biotecnológica para la optimización de compuestos con actividad biológica, principalmente la antiinflamatoria. El Capítulo I describe la adaptación de C. chayamansa y la obtención de explantes asépticos. Los callos se obtuvieron con ayuda de diferentes reguladores del crecimiento vegetal (PGRs), mezclando una auxina con una citoquinina, como resultado de lo anterior se obtuvieron callos con mejor morfología utilizando la mezcla de ANA (5 mg/L) + BAP (2.5 mg/l). Posteriormente en el Capítulo II se utilizó la combinación de ANA (5 mg/L) + BAP (2.5 mg/L) para obtener el cultivo de células en suspensión; realizando una cinética de crecimiento celular de la cual se obtuvieron los siguientes parámetros: 1) tasa de crecimiento (�� = 0.078�������); 2) tiempo de duplicación de la celda (�����= 8.8 ��); 3) biomasa máxima (��௫ = 8,98 ± 0,02 ���/���� ;(4 (tasa de crecimiento (������� = 6,23 ± 0,056 ���/�����(.
Se identificó que el día 40 post cultivo se concentró la mayor cantidad de metabolitos secundarios, posteriormente se elaboró el extracto CHCl3:MeOH denominado ANB. Se detectaron SCO, β-sitosterol, AL, acetato de moretenol y otros triterpenos en el extracto de ANB mediante TLC y mediante HPLC, se identificaron ácido cafeico, ácido ferúlico, ácido cinámico, quercetina y se cuantificó α-amirina (82,83 mg/g ANB DW). , acetato de β-amirina (82,31 mg/g ANB DW), escopoletina (SCO) (38,88 mg/g ANB DW) y acetato de lupeol (LA) (38,1 mg/g ANB DW). Finalmente, en el capítulo III se describe la actividad antioxidante, antibacteriana y antiinflamatoria del extracto de ANB, resultando un valor de IC50 de 16,60 mg/mL para el potencial antioxidante in vitro. Por otro lado, se evaluó la actividad antibacteriana y el extracto de ANB resultó moderadamente activo contra tres cepas de S. aureus (ATCC 23,235), S. coagulasa (ATCC 93, 410) y C. albicans (ATCC 10,231). El extracto de ANB mostró una mayor actividad antiinflamatoria que la ya reportada previamente para el extracto de plantas silvestres en el modelo de inflamación aguda sistémica (carragenano) mostrando una DE50 = 223,87 mg/kg, mientras que para el modelo de inflamación aguda tópica (TPA) la DE50 fue 0,48 mg/oído. En cuanto a la evaluación de la actividad antiinflamatoria crónica, se realizó con el modelo crónico de TPA. Se utilizó un fármaco de referencia (indometacina) a la dosis de 8 mg/kg y el extracto de ANB a la dosis efectiva promedio previamente calculada en el modelo agudo de carragenina donde el extracto se administró por vía intragástrica (225 mg/kg), observándose una disminución en la peso en todos los tratamientos, así como una disminución en el tamaño de las orejas en el grupo control TPA+ ANB. Finalmente, también se midió la actividad de la enzima mieloperoxidasa, la cual fue inhibida en un 34,55% en el grupo tratado con el extracto de ANB, similar a la que mostró el fármaco de referencia (40,02%).
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