Influencia de la timulina sobre la esteroidogénesis in vitro en las células de la teca de ovarios de ratón Público Deposited
La timulina es un nonapéptido sintetizado exclusivamente por las células retículo epiteliales del timo. Participa en la regulación de las funciones reproductoras de manera estimulante en todos los niveles del eje hipotálamo-hipófisis-gónada. In vitro la timulina estimula la secreción de 17β-estradiol por células de la granulosa. Cuando a estas células se les adiciona FSH, la timulina estimula la secreción tanto de progesterona como de 17β-estradiol. Con base en estos antecedentes, en el presente estudio se analizó la posible participación de la timulina en la regulación de la biosíntesis de andrógenos por células de la teca del ovario de ratón Se utilizaron ratones hembra prepúberes de la cepa CD1 de 20 días de edad, inyectados con 5 u.i. de gonadotropina coriónica equina (eCG), sacrificados a las 48 h. Se extrajeron los ovarios de manera aséptica y se colocaron en medio de cultivo. Las células de la teca se obtuvieron por gradientes discontinuos de Percoll. En cajas de cultivo se sembraron 1x105 células/ml de medio DMEM/Ham-F12 suplementado y se incubaron a 37 °C. A las 24 h se cambió el medio de cultivo y los cultivos se dividieron entre las variables requeridas según el diseño experimental. En todos los ensayos se contó con un grupo sin tratamiento (secreción basal) y se realizaron tres ensayos por triplicado. Se cuantificaron las cantidades de progesterona y androstenediona en el medio de cultivo por quimioluminiscencia. Para determinar la concentración efectiva al 50% (CE50) de la hormona luteinizante (LH) que estimula la secreción de progesterona y androstenediona in vitro, los cultivos se incubaron con diferentes concentraciones de LH (0, 12.5, 25, 37.5, 50, 62.5 y 75 ng/ml) durante 24 h. El aumento en la secreción de progesterona y androstenediona fue similar con todas las concentraciones de LH utilizadas, por lo que se consideró 12.5 ng/ml como la CE50 de LH. En los cultivos de células de la teca incubados por 24 h con concentraciones crecientes de timulina (0, 0.001, 0.01 ng/ml) tanto la secreción de progesterona como de androstenediona fueron inhibidas al adicionar 0.001 ng/ml de timulina. La adición de 0.01 ng/ml de timulina, resultó en la inhibición de la secreción de androstenediona y no se modificó la de progesterona. En las células de la teca incubadas con 12.5 ng/ml de LH y 0.001 ó 0.1 ng/ml de timulina la secreción de progesterona y de androstenediona fue menor que la estimulada con LH. A partir de los resultados obtenidos, proponemos que en las células de la teca de los ovarios de ratón, la timulina regula de manera inhibitoria la secreción de la progesterona y androstenediona, tanto en condiciones basales como estimuladas con LH.
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