Actividad cicatrizante y caracterización química del látex de Jatropha neopauciflora en un modelo experimental de diabetes Público Deposited
La diabetes mellitus (DM) se define como un grupo de trastornos metabólicos caracterizado por hiperglucemia crónica que a largo plazo provoca complicaciones en el organismo. Los pacientes con DM suelen presentar heridas crónicas, principalmente en los miembros inferiores que a menudo culminan en amputación, contribuyendo a su invalidez y mortalidad. Aunque existen medicamentos auxiliares en el proceso de cicatrización de pacientes con DM, éstos pueden presentar efectos adversos y, debido a que sólo presentan un blanco de actividad, es necesaria la prescripción de varios medicamentos con acciones diferentes, principalmente antiinflamatoria, antibacteriana y cicatrizante (promotores de la proliferación celular). Dado que el tratamiento adecuado de una herida requiere de un enfoque integral y completo, a menudo es inaccesible para gran parte de la población debido a su alto costo. Jatropha neopauciflora (Euphorbiaceae) es una especie 2 evaluó la actividad cicatrizante del látex a nivel histológico en ratones sanos y diabéticos. Los resultados mostraron que el látex aceleró el proceso de cicatrización, pues se observaron diferencias en cuanto a la cantidad de fibroblastos activos en la zona de la herida, además de una epidermis delgada y ordenada. Se repitió el mismo experimento, pero aumentando el número de días después de inducida la diabetes, hasta la semana 2, para realizar la incisión, sacrificándolos al día 7 de tratamiento. El tratamiento con el látex provocó un incremento en el número de fibroblastos activos, de manera similar al control positivo, mostrando una disposición tisular de la epidermis más completa. El efecto citotóxico del látex fue evaluado en dos líneas celulares: fibroblastos 3T3-L1 y CaSki. En fibroblastos la CL50 fue de 1000 µg/mL, mientras que en CaSki fue de 1250 µg/mL. El látex no fue citotóxico en ninguna de las dos líneas celulares estudiadas. También se evaluó la capacidad antioxidante del látex por el método de reducción del radical DPPH, obteniendo un CA50= 5.4 µg/mL. Se cuantificaron fenoles totales mediante el método modificado de Singleton, obteniéndose una concentración de 6.9 mg (eAG)/g de látex. La cantidad de flavonoides totales se realizó por el método colorimétrico de Dowd, la concentración total fue de 12.53 EQ /g de extracto. La concentración de proteínas del látex, mediante el método de Bradford, fue de 7.62 μg/mL. La concentración de carbohidratos por el Método de Nelson-Somogyi fue de 9.26 μg/500 L de látex. De esta extracción, una parte se inyectó al HPLC, confirmando la presencia de fructosa. Por último, con el látex se realizó una cromatografía de exclusión en gel; se obtuvieron 58 fracciones que fueron sometidas a HPLC. Se identificó la presencia de catequina. 3 Aunado a esto, las fracciones que presentaron los mayores rendimientos fueron evaluadas en relación con su capacidad antioxidante; sólo 9 fracciones de las 24 evaluadas mostraron una CA50 menor a 50 µg/mL Se puede concluir que el látex de J. neopauciflora contiene varios compuestos con actividad biológica, los cuales podrían estar actuando de manera sinérgica para acelerar y propiciar una buena cicatrización, con propiedades antibacterianas, antioxidantes y antiinflamatorias, que podrían ser útiles para el tratamiento integral de heridas en pacientes con DM.
Diabetes mellitus (DM) can be defined as a group of metabolic disorders characterized by chronic hyperglycemia that in the long-term causes complications in the body. Patients with DM usually have chronic wounds, mainly in the lower limbs that often culminate in amputation, contributing to their disability and mortality. Although there are auxiliary drugs in the wound healing process of patients with DM, these can have adverse effects and, because they only present a level of activity, it is necessary to prescribe several drugs with different actions, mainly anti-inflammatory, antibacterial and healing (promoters of cell proliferation). Since proper treatment of a wound requires a comprehensive and comprehensive approach, it is often inaccessible to a large part of the population because of its high cost. Jatropha neopauciflora (Euphorbiaceae) is an endemic species of our country whose latex is used to treat wounds, scarring, oral infections and when there are loose teeth. In this paper, we propose the idea that the latex of this species contains compounds with antibacterial, antioxidant, anti-inflammatory and proliferative activity that could contribute in an integral way to accelerate and improve the process of wound healing in an experimental model of diabetes. First, the wound-healing efficacy of latex was evaluated by the tensiometrical method in healthy mice. The three concentrations of latex showed an efficacy of 100%, whereas the control group only reached 80%. Later, the wound-healing activity of latex was evaluated histologically in healthy and diabetic mice. The results showed that the latex 5 accelerated the wound-healing process, as differences were observed regarding the number of active fibroblasts in the wound area, as well as a thin and orderly epidermis. The same experiment was repeated, but mice were maintained for 14 days with diabetes, then performed the incision and were sacrificed at day 7 of treatment. Treatment with the latex induced an increase in the number of fibroblasts, like the positive control, showing a more complete tissue arrangement of the epidermis, including the presence of hair follicles. The cytotoxic effect of latex was evaluated in two cell lines: Ca Ski and fibroblast cell line 3T3-L1. The latex did not result cytotoxic in any of the two cell lines studied. The antioxidant capacity of the latex was evaluated by the DPPH radical reduction method, obtaining a CA50= 5.4 μg / mL. Total phenols were quantified using the Singleton modified method, obtaining a concentration of 6.9 mg (eAG) / g of latex. The total flavonoids were measured by the Dowd´s colorimetric method. The total concentration was 12.53 eQ / g extract. The protein concentration of the latex by the Bradford method was 7.62 μg / mL. Carbohydrate concentration by the Nelson-Somogyi Method was 9.26 μg / 500 mL of latex. From this extraction, one part was analyzed by HPLC, confirming the presence of fructose in the latex. Finally, with the latex a gel exclusion chromatography was performed, obtaining 58 fractions which were also subjected to HPLC, observing catechin presence. In addition, the fractions with the highest yields were evaluated for their antioxidant capacity; only 9 fractions of the 24 evaluated showed a CA50 of less than 50 μg / mL. 6 We can conclude that the latex from Jatopha neopauciflora contains several compounds with biological activity, which could be acting synergistically to accelerate and promote a good wound-healing, with additional antibacterial, antioxidant and antiinflammatory properties, which could be useful for the integral treatment of wounds in patients with DM.
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