Estudio morfométrico y taxonómico de dinoflagelados del género Ceratium (Neoceratium), con énfasis en N. balechii Público Deposited
The morphometric study is a tool for delimitation of species, however in Dinoflagellates is complicated and demand a big labour under microscopy. Works previous about Ornithocercus and Prorocentrum genus, both they are part of the “Biología y Filogenia Molecular de Dinoflagelados del Pacifico Mexicano” proyect, who is funded by the National Council of Science and Technology (CONACyT) and who point the importance about morphometric studies. This research about some species complex is part of this proyect too, which aims to obtain morphological characters and the internal transcribed spacer (ITS) region that enable the distinction between a complex of species of the genus Neoceratium. N. balechii, N. divaricatum and N. longipes was included in a morphometric study use eight continuos characters in 1022 organism: length total (lt), transdiameter (t), apical horn length (lca), both antapical horns length (lcder and lcizq), distance between both horns antapical (dseca) and distance between hipotecal base to cingulum (dbhc). Analysed with statistics technical (bi and multivariate): Analysis of Variance (ANOVA), Dendrogam (Cluster), Principal Components Analysis (PCA) and Discriminant Analysis (DA) with NCSS program. The finality of use this analysis are to know variation, importance and diagnosis value of importance of characters on delimitation of species. To obtain ITS protocol was performed according to the technique "single cell PCR"described by different authors using primers F 5 'CGT AGG TGA ACC TGC GGA AGG ATC A 3', R 5 'TTC CAC CCT GTT CCG TTA TCG CT 3 'and 5'-A AGC CCA GTA ATC ACA TTC TAG AGG (ACT) TCC GTA GGT-3', 5'-CCTGCAGTCGACA B (TG) ATGCTTAA (AG) TTCAG C (AG) GG-3 '. All characters had statistic signification with P’s˂ 0.00005 DA show statistic signification with three first discriminant functions (P’s˂ 0.00005 y λWilks=0.42759), variables more important in species separation are dbhc, lcder, lcizq y rc. While lt, lca y dseca are the most important in separation forms of C. balechii. It is concluded that the species N. balechii, N. divaricatum and N. longipes are different and distinct. The eight characters used are sufficient and diagnostics for the delimitation of these species. Although the forms of N. balechii statistically significant differences, supporting the hypothesis that both forms are independent of other conspecific taxa because the characters are separated by which respond mainly to the size of these. Because the sequences of ITS regions were unable to obtain this report shows the great importance of the implementation of a large morphometric study.
Los estudios morfométricos permiten identificar caracteres que ayuden a la delimitación de especies. Esto es poco usado en el estudio de los Dinoflagelados ya que al ser organismos microscópicos la obtención de las medidas resulta un tanto complicada y requiere de un gran trabajo. A través de una serie de estudios anteriores realizados en los géneros Ornithocercus y Prorocentrum, vinculados entre si por el proyecto “Biología y Filogenia Molecular de Dinoflagelados del Pacifico Mexicano” financiado por el CONACYT, se ha destacado la gran importancia de estos estudios. Y del cual se desprende también esta tesis, cuya finalidad es obtener caracteres morfológicos y secuencias del espaciador interno transcrito (ITS) que hagan posible la delimitación entre un complejo de especies del género Neoceratium. Se hizo un estudio morfométrico con ejemplares de Neoceratium balechii f longum y f balechii, N. longipes y N. divaricatum, considerándose ocho caracteres continuos en 1022 organismos: longitud total (lt), transdiámetro (t), longitud del cuerno apical (lca) y antapicales (lci y lcd), distancia entre cuernos antapicales (dseca) y distancia entre base de la hipoteca y cuernos antapicales (dbhc). Estos fueron analizados con técnicas estadísticas bi y multivariada como: Análisis de varianza (ANOVA), Dendograma (cluster), Análisis de Componentes Principales (ACP) y Análisis de discriminantes (AD) usando el programa NCSS; para conocer la variación, importancia y valor diagnostico en la delimitación de especies. Para la obtención de las ITS se procedió a realizar protocolos de acuerdo a la técnica “single cell PCR” descrita por diferentes autores usando los cebadores F 5’ CGT AGG TGA ACC TGC GGA AGG ATC A 3’; R 5’ TTC CCT GTT CAC TCG CCG TTA CT 3’ y A 5’-CCA AGC TTC TAG ATC GTA ACA AGG(ACT) TCC GTA GGT-3’; B 5’- CCTGCAGTCGACA(TG)ATGCTTAA(AG) TTCAG C(AG)GG-3’. Todas los caracteres mostraron diferencias significativas interespecíficas (P’s˂ 0.00005). El ACP tuvo una varianza acumulada del 90% con las tres primeras componentes siendo las variables que aportan mayor información lca, dseca, t, lcizq, rc. El AD mostró que existen diferencias significativas interespecíficas para las tres primeras funciones (P’s˂ 0.00005 y λWilks=0.42759), las variables morfológicas dbhc, lcder, lcizq y rc tuvieron la mayor contribución para la separación de las especies. Y en la separación de las formas de C. balechii las variables más importantes fueron lt, lca y dseca. Por lo que se concluye que las especies N. balechii, N. divaricatum y N. longipes son diferentes y distintas. Que los ocho caracteres utilizados son suficientes y diagnósticos para la delimitación de estas especies. Y aunque las formas de N. balechii estadísticamente presentan diferencias significativas, se apoya la hipótesis de que ambas formas son conespecíficas e independientes de otros taxa ya que los caracteres por los cuales se separan responden principalmente al tamaño de estas. Debido a que las secuencias de las regiones de ITS no se pudieron obtener este estudio muestra la gran importancia que tiene la aplicación de un buen estudio morfométrico.
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